旷场检测是衡量大鼠/小鼠气虚及其程度的较好指标。但是,与大多数大鼠/小鼠的行为学检测方法一样,旷场检测不够稳定,重复性较差。为此,通常建议延长检测时间和多次重复检测,但这往往导致被检动物的疲劳、耐受,检测值逐渐下降,偏离真实。因此,增加一些检测便捷、重复性较好的检测手段,综合使用很重要。我们的比较发现,大鼠/小鼠最大抓力检测是一个好方法:在自然状态下,大鼠/小鼠会抓握抓力测定仪上的栅栏,当握住其尾根部向后牵拉时,大鼠/小鼠会出现保护性反应,紧紧抓握栅栏。当操作者继续恒定加大牵拉力时,可以将大鼠/小鼠拉离栅栏,得到最大抓力值(简称抓力)。经观察,抓力检测较旷场检测更稳定、重复性好、检测速度快,与旷场检测结合,可以较好地检测大鼠/小鼠气的盛衰。
(1)设备
YLS-13A型大鼠/小鼠抓力测定仪(图3-2-4,山东省医学科学院设备站,最大拉力为5000g,读数精度0.1g,拉力误差小于0.3g),个人电脑,SPSS10.0统计软件等,YLS系列药理实验仪器数据通讯程序。
(2)方法
1)仪器水平放置的调整:将仪器放置于水平的桌面上,调整仪器下的两个前机脚,使仪器上的水平气泡稳定在水准器中心的黑圈中心,目的使抓力板呈水平方向。
2)接通电源:将仪器用电源线连接上电源,打开仪器背面的电源开关,仪器LED显示屏显示当前时间。
3)设置:按动“设置”按钮,显示屏显示数字,按动“+”或“-”键可改变1~10个数字,每个数字标示取运行几次测试结果进行平均,该数值如设定为“2”,表示输出结果将是这只动物连续2次测试结果的均值。继续按“设置”键可以设置时间。
4)运行:设置完成后,按“运行”键,运行和读数指示灯都亮,表示仪器进入运行状态。
5)测定:按“测定”键,测定灯亮,这时可将动物轻轻地放在抓力板上,抓住鼠尾沿水平方向轻轻向后牵拉(注意不可猛拉),待动物抓牢抓力板后,均匀用力后拉,致使动物松爪,这时仪器会自动记录动物的最大抓力,并伴有音响提示。如果使用了取均值功能,则只有测试达到设定的次数时才有音响提示。
6)以上测定的抓力会自动保存于仪器的内存里,采用配备的软件“YLS系列药理实验仪器数据通讯程序”可以将所有数值拷贝到电脑Excel表格中。
(3)注意事项
1)动物的抓持与放置:大鼠抓持时应轻拿轻放,避免将其激怒影响操作。右手将大鼠抓住后按放在抓力板上,左手向前推住抓力板,然后右手向后滑至鼠尾部,左手轻轻松开抓力板,抓力板随右手拉鼠尾的力量向前滑行,待动物用力抓住抓力板时应及时加力后拉,使其测到动物的最大抓力,如果不及时加力动物会主动松爪回身攻击或逃避。小鼠的操作与大鼠类同,且操作相对容易些。
2)基于每人操作手法不同,建议同一时间内和同一批次不同时间检测时,由同一实验者进行操作,可以减少误差。
3)动物轻放在抓力板上,要求停顿数秒后再开始牵拉,否则动物很有可能在没有抓住板后就被快速拖过整个板面且得不到正确数值,在大批量快速操作时,操作者为追求效率,尤其可能出现这种情况。
4)仪器的数据分组功能只能达到10组,其后新的数据进入,前面的数据会被取代而丢失,因此每次检测结束并将数据输入计算机后,宜清除仪器里面的数据,以备下一次的检测。
5)为减少检测结果的误差,大鼠/小鼠的放置位置很重要,建议将其放于抓力板中央区域,不偏不倚,否则测出的未必是最大抓力。
6)对一只大鼠/小鼠而言,同一时间内,多次检测,其抓力读数会减弱,因而通常采用一次测试定结果。