1.颈椎脱臼法
颈椎脱臼就是用外力将动物颈椎脱臼,使脊髓与脑髓断开,致使实验动物无痛苦死亡。由于其能使实验动物很快丧失意识、减少痛苦、容易操作、动物内脏不受损害等优点,被认为是很好的实验动物安乐死方法。
颈椎脱臼法常用于小鼠、大鼠、沙鼠、豚鼠、家兔等小型实验动物的安乐死操作。
(1)大鼠、小鼠的颈椎脱臼 将小鼠固定在饲养盒盖上,一手抓住鼠的尾巴,稍用力向后拉,另一只手的拇指和食指迅速用力往下按住其头部,或使用手术剪刀或镊子快速压住小鼠的颈部,两只手用力,使之颈椎脱臼,从而造成脊髓与脑髓断离。也可以用拇指和食指或木棒或金属置于小鼠颈的背侧并向一坚硬面猛压产生颈椎脱位。颈椎脱位的有效性由颈部组织的分离予以证实。脱位后心脏继续搏动,利于临终前采取样品。
大鼠的颈椎脱臼同小鼠。
(2)豚鼠、仓鼠的颈椎脱臼 该种动物由于颈部肌肉发达、颈肩部皮肤松弛,用此法困难较大。
可使用从前方抓住动物的头再猛拉其身体 , 致使其颈椎脱臼。
(3)家兔的颈椎脱臼 lkg以下的家兔可用一只手在腰部抓住其后肢,另一只手抓住其头颅,并用力拉伸其颈部致使其颈椎脱臼。
(4)鱼纲的颈椎脱臼 将铅笔或拇指或小棍插入鱼嘴中,用另一只手握住鱼身,将头脚侧用力即可致使其颈椎脱臼移位。
2. 断头法
断头法虽然残酷,但由于其过程是一瞬间的,且脏器含血量少,故也被列于实验动物安乐死的一种,主要用于哺乳纲啮齿目、兔形目、两栖纲、鸟纲、鱼纲等实验动物的安乐死。
断头时通常使用断头器快速切断延髓,使头颅与身体迅速分离。操作时将断头器固定于实验台上,用左手按住实验动物的脊背部,拇指放在右腋下部,用食指和中指夹住左前腿。将实验动物的颈部放在断头器的开口部,慢慢放下刀柄。但接触到实验动物时,用力按下刀柄切断其颈部即可。
注意防止血液的喷出对实验人员的影响。
3. 吸入法
(1)二氧化碳吸人窒息法 将待安乐死处死的实验动物置于可封闭的箱中,按SOP规划、释放二氧化碳使实验动物窒息而亡。此法较常用于哺乳纲啮齿目、兔形目、两栖纲、鸟纲、鱼纲等实验动物的安乐死。
(2)麻醉药物吸人窒息法 可将实验动物投入盛有乙醚、氟烷等挥发性气体的干燥器时玻璃缸中,按SOP规定释放麻醉药物使实验动物过量吸人麻醉剂而死亡。
注意液态麻醉剂应不与实验动物身体接触。
4.注射法
实验动物注射法安乐死的主要化学物有巴比妥钠类、乌拉坦类、甲磺酸三卡因等化学物。也可以注射空气使其无痛死亡。常见化学药物安乐死主要有戊巴比妥锅注射法等。
(1)小鼠、大鼠、豚鼠、沙鼠、仓鼠的戊巴比妥钠注射法使用腹腔注射该药物150~200mg/kg可使动物呼吸停止,必要时要检查动物的心脏是否跳动。
(2)家兔的戊巴比妥钠注射法首选静脉注射(注射剂量为100mg/kg) 给药途径,既人道、又安全有效。
腹腔、胸腔、心内注射也可安乐处死家兔。
(3)犬的戊巴比妥钠注射法给药途径同家兔。用3倍于麻醉剂量的戊巴比妥钠可以保证犬先呼吸停止,然后心跳停止。
静脉注射是最佳的安乐死给药方法,其静脉注射剂量为90~l00mg/kg。
(4)猴的戊巴比妥钠注射法给药途径同家兔。将动物保定或挤压于笼内一侧,静脉注射100mg/kg实施安乐死。
(5)猪的戊巴比妥钠注射法
5. 空气栓塞法安乐死
该方法常用于家兔。
通过静脉注射5~5Omg/kg的空气就可导致家兔迅速死亡,但动物伴有抽搐、角弓反张、瞳孔扩大、嘶叫等现象。