舌苔是中医望诊的重要内容，对于观察气血阴阳、神气和精气的充盈盛衰、血瘀等病理改变十分重要。鉴于大鼠/小鼠舌不会主动配合地伸出来，我们采用麻醉的方法，经过探索，建立了麻醉后大鼠/小鼠望舌方法。所采集的舌象，可以对其红色程度等进行数据提取、挖掘和分析，用于计量化诊断和疗效评价，优于传统意义上的望诊。但是，麻醉会影响大鼠/小鼠的气血运行，且大大增加了检测的难度和时间，一些患病动物甚至还不能麻醉，故此大鼠/小鼠舌象的观察，不宜作为常规的检测手段。此外，在普通光源下，大鼠/小鼠的舌苔不宜察觉，因此其检测方法还有待发展。

(1)设备和试剂

1)非创伤性引导大鼠/小鼠舌伸出装置：大鼠/小鼠上、下颌撑开弹性支架(直径0.6mm的钢丝)、支架固定倾斜柱、大鼠/小鼠仰卧垫板等3部分组成(图3-2-3)。

2)体视显微镜、摄像专用光源、数码相机等同前。

3)注射器：1ml注射器、5ml注射器各数支。

4)试剂：10％乌拉坦溶液。

(2)方法

1)组装非创伤性引导大鼠/小鼠舌伸出装置：将支架固定柱固定于底板右上角。支架固定柱上端成45°的斜面，斜面上有固定上下颌撑开弹性支架的铁钉，使每次检测大鼠/小鼠下颌部保持在同一位置上。大鼠/小鼠上下颌撑开弹性支架根据不同体积的大鼠/小鼠上下颌张开的中等宽度确定，支架上下两端为直径1.4～2.5mm的套孔，成90°夹角，用于套住大鼠/小鼠上、下门齿，其张开的距离为1.5cm。下套孔心距离底板垂直距离20mm，距离固定柱边缘1.4cm；上套孔圆心距离底板垂直距离30mm，距离固定柱边缘1.6cm。用橡皮筋将弹性支架末端固定，以确保支架每次检测时所固定的位置。

2)体视显微镜、数码相机、光源等安装同爪尾显微拍照，令相机显示屏可以清晰显示大鼠/小鼠的舌象。小鼠显微镜放大倍数调至15倍，大鼠则为8倍。

3)设置数码相机参数同前。

4)拍照者左手持数码照相机，右手微调显微镜，使视野达到最清晰状态，进行白平衡。白平衡后将曝光锁定在同一水平，以保证每只大鼠/小鼠舌的曝光指数一致。

5)麻醉大鼠/小鼠：为确保各组全部大鼠/小鼠舌象的快速采集，通常在拍摄前15min分别对各组大鼠/小鼠进行麻醉：采用10％乌拉坦，按15mg/10g的剂量腹腔注射，常5～10min后起效，若大鼠/小鼠仍然保持清醒或半清醒状态，继续给予追加量5mg/10g进行腹腔注射，以保证大鼠/小鼠进入麻醉状态。

6)引导大鼠/小鼠伸舌的操作：①取出麻醉的大鼠/小鼠，使其仰卧，置于大鼠/小鼠上下颌撑开支架垫板上。②用大鼠/小鼠上下颌撑开弹性支架的上孔套于大鼠/小鼠的上颌齿，轻轻向上撑开，当大鼠/小鼠口腔被充分暴露后，快速将大鼠/小鼠上、下颌撑开弹性支架的下孔套于大鼠/小鼠的下颌齿，此时由于支架的弹性作用，大鼠/小鼠的上、下颌被撑开，口腔充分暴露。③快速将弹性支架固定于固定柱上，以确保每只大鼠/小鼠舌面距离显微镜物镜距离一致。此时，大鼠/小鼠仰卧于垫板上，口展开，向上呈45°角，多数大鼠/小鼠舌会自动伸出。对于伸展不利者，可采用采用1ml一次性注射器内芯轻轻拨正。④将整个装置移入显微镜下的同一位置，使大鼠/小鼠舌面正对物镜。⑤舌面中轴线与光照方向角度的调整：光线从大鼠/小鼠舌尖右侧方向射入，光线与大鼠/小鼠舌面中轴线呈45°夹角。

7)显微拍照。拍照者站在拍摄装置的中间位置，引导大鼠/小鼠舌伸出者站在拍摄者的左侧位置。将大鼠/小鼠移入显微镜下预设的取景框内，数码相机液晶显示屏上见大鼠/小鼠舌象清晰图像时，预对焦后按下快门，即可拍摄到大鼠/小鼠舌的照片，随后依次拍摄其余大鼠/小鼠舌象。

8)依次直至各组大鼠/小鼠所有舌象拍摄完毕。

9)将照片输入电脑，采用Photoshop7.0图像软件进行图像处理：将舌面从舌尖到舌根均等分为五等份，取位于中间的五分之一面积作为舌象的量化分析域。色度提取和分析同前。

(3)注意事项

    1)建议开展预初实验，以观察待检大鼠/小鼠对麻醉剂的反映，得到最佳用药量、估计麻醉到自然清醒的时间。

    2)麻醉后，应即刻拍摄舌象，以免麻醉后时间延长，大鼠/小鼠舌面津液逐渐减少甚至干燥，出现朱点。

    3)拨舌用的牙签，尖端要求磨钝，以免刺伤舌体。

    4)采用1ml一次性注射器内芯(黑色头质软且不损伤舌体)拨正舌的位置时，请勿触及大鼠/小鼠舌面。

    5)拍摄舌象后，须仔细观察大鼠/小鼠，以免麻醉过度而致死亡。清醒后充足的饮水供应十分必要。

    6)麻醉对大鼠/小鼠舌象可能的影响：在自然状态下，由于大鼠/小鼠的自主保护和抵抗，难以实现舌象的非创伤性采集。尤其是大鼠/小鼠的抵抗，会显著干扰其气血运行，有悖中医诊法的基本要求。因此，欲采集大鼠/小鼠舌象，麻醉是最好的办法。但是麻醉后，大鼠/小鼠自然气血运行会受到影响，导致舌象的部分改变。