望诊是中医四诊的重要内容。其中面部、舌苔的望诊，对于观察气血阴阳、神气和精气的充盈盛衰、血瘀等病理改变十分重要。但是，大鼠/小鼠体积小，且面部具有被毛，舌又不会主动配合地伸出，致使观察十分困难。我们的长期研究表明，大鼠/小鼠爪面的角化质薄，在标准检测光源等显微放大的条件下，与望舌类似，可以很好地观察其气血阴阳、神气和精气的充盈盛衰、瘀血等病理改变。采取此种方法可以部分解决大鼠/小鼠观察面部、舌苔时的困难。而且所采集的爪象或尾象，还可以对其红色程度等进行数据提取、挖掘和分析，用于计量化诊断和疗效评价，优于传统意义上的望诊。

(1)设备

SQF-EA体视显微镜，3200K(色温)、250W摄像专用光源，标准光源架，NIKON Coolpix 4500数码相机，显微镜与数码相机接口；个人电脑，Photoshop7.0图像软件，SPSS10.0统计软件等。

(2)方法

1)安放SQF-EA体视显微镜于检测台上，接上数码相机接口；显微镜物镜距载物台180mm，显微镜放大倍数调至8倍。将摄像管道的门闩拉开，并将物镜盖打开，检查显微镜的放大倍数、物镜与载物台的高度，调节并保证每次的放大倍数及高度一致。

2)安放专用光源，位于显微镜右侧，与载物台平行，光源距被观察爪、尾260mm，距被摄体垂直高度160mm，距被摄体水平距离190mm。插入电源，将光源打开，预照3min，稳定光照。

3)安放数码相机，相机显示屏可以清晰显示小鼠的爪、尾图像。

4)设置数码相机参数：①拍摄模式：手动(M)。②曝光模式：M(1/30， F4.5)。③最佳拍摄：BSS。④取消内置式闪光灯。⑤像素(影像尺寸)：1600×1200。⑥影像品质(帧数)：Normal。⑦对焦模式：近拍。⑧感光度(ISO)：400。⑨测光：矩阵测光(Matrix)；曝光锁定：AE-L。

5)将待检测大鼠/小鼠连笼具轻轻移入检测室。

6)两人操作：拍照者站在拍摄装置的中间位置；抓持者站在拍摄者的左侧位置。抓持者熟练地轻持大鼠/小鼠左后爪或尾，移入显微镜下预设的取景框内，以便拍照者拍摄。

7)拍照者左手持数码照相机，右手微调显微镜，使视野达到最清晰状态，进行白平衡(若首次已经白平衡，以后相机未再设置的条件下，可以不再白平衡)。白平衡后将曝光锁定在同一水平，以保证每只爪的曝光指数一致。

8)先将大鼠/小鼠置于平整光滑的室温(24℃)桌面上，抓持者用左手小指、无名指轻轻捏住小鼠的尾巴中末段，然后用腕力向前轻轻旋转半圈将小鼠尾根部固定与左手小指、无名指之间，再将拇指、食指、中指适度张开，轻轻捏住小鼠的颈部皮毛，将小鼠的背部紧贴于左手掌心，并将小鼠的腹部朝上；然后右手的拇指食指轻轻地捏住小鼠左后肢的膝关节至髋关节外侧的皮毛，并快速地将左后爪移入显微镜的视野区内，将爪的趾端方向朝显微镜的前方，爪面朝上。为大鼠的爪拍照时，抓持动作和爪的放置方向与小鼠稍有不同，以左手掌轻轻握住大鼠的整个背部，并将其腹部朝上，右手动作同小鼠。爪的方向：小鼠是垂直方向，大鼠是水平方向，大鼠的趾端朝向光源端。

9)拍摄者在数码相机的液晶显示器内观察爪的位置，并要求抓持者按照拍照需要的位置适当移动，以保证大鼠/小鼠踝关节以下的全部爪的部位，或尾巴根部在视野内。

10)当观察到最清晰的爪或尾巴根部时(若不够清晰，可以适当调节显微镜的微调钮，直至最清晰为止)，迅速按下快门，即可以拍摄到该爪或尾中段的最佳照片。

11)尾的抓持方法：以左手掌心轻轻压住大鼠/小鼠背部，右手拇指食指轻轻将尾尖部捏住，然后快速将尾的中段移入显微镜的视野区内。小鼠左手轻轻罩住头背部，大鼠则需要稍用力按压住颈部。

12)依次直至各组大鼠/小鼠所有爪或尾拍摄完毕。

13)拍摄次序，先全部完成同组大鼠/小鼠爪的拍摄，再完成尾的拍摄。也可以一次完成一只大鼠/小鼠的爪、尾拍摄，再进行下一只，这样可以减少一次因抓持给动物的刺激，还可以提高速度。

14)将照片输入电脑，采用Photoshop7.0图像软件进行图像处理：

①爪、尾的R、G、B色度的提取和r、g、b的计算

镜下，大鼠/小鼠掌部有6个肉垫，掌中部2个为掌基肉垫，掌根部4个为趾基肉垫。在Photoshop7.0图像软件状态下，大鼠/小鼠掌部颜色图像处理选取范围：右上侧趾基肉垫的上缘和右侧缘作为取景的上缘和右侧缘，以左下趾基肉垫下缘作为取景的下缘，以左上趾基肉垫的左侧缘作为取景的左侧缘，框定大鼠/小鼠爪该范围的掌部读取R、G、B的色度(R代表红色，G代表绿色，B代表蓝色)。大鼠/小鼠尾部取镜头中间尾左右边缘和其间距一倍的长度，这样一个长方形范围内作为框定范围，读取R、G、B的色度(国际标准色的定量)。

按以下公式分别求出r、g、b，其中r表示R分量值占RGB总和的百分比，g表示G分量值占RGB总和的百分比，b表示B分量值占RGB总和的百分比，分别反映红颜色的程度(r)、绿颜色的程度(g)和蓝颜色的程度(b)。其意义在于：

r值愈大则愈红，愈小则愈淡。b值愈大则愈青紫，愈小则相反。g值愈大则愈暗，愈小则相反。在中医望诊中，暗和青紫均是血瘀的表现。r、g、b的定量分析有助于颜色计量化诊断和疗效评价。

计算公式如下：

    r＝R/(R+G+B)

    g＝G/(R+G+B)

    b＝B/(R+G+B)

②胖瘦系数f值的计算

采用Photoshop7.0图像软件，读取爪中指近掌1/3处横径值，以及掌面右侧上、下两趾基肉垫下缘间距值。采用Excel，以爪中指横径/掌面右侧上下趾基肉垫下缘间距，求出胖瘦系数f。f值愈小提示愈瘦，愈大则愈胖或愈肿。

(3)注意事项

1)抓持大鼠/小鼠爪、尾的动作宜轻，以免造成动物的不适，甚至压迫血管。

2)整个实验应迅速完成，以保证前后大鼠/小鼠检测条件一致。