【造模机制】角膜实质层占角膜厚度90％，由100～200层排列规则的胶原纤维组成，角膜板层纤维之间有少量的角膜固有细胞。当角膜损伤和炎症时，可诱使这些细胞演变为成纤维细胞，参与损伤部位的修复。角膜无血管，其营养来源于房水、泪膜和角膜缘毛细血管。细菌性角膜炎(bacterial keratitis)炎症期损伤部位的上皮层及实质层细胞亦可释放出蛋白水解酶，导致溃疡变深和增大。眼结膜和泪腺也参与炎症反应，表现结膜红肿充血，淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞增多，泪液可冲洗结膜囊和角膜表面。泪液中含有某些抗菌性溶菌酶、免疫球蛋白具有杀菌作用。但机体修复快慢与角膜损伤深浅、细菌毒力强弱、感染细菌量多少有关。铜绿假单胞菌是目前眼科致病性较强的细菌。由于该菌产生多种溶解酶可引起局部组织的降解，导致机体对细菌产生炎性反应，表现角膜组织破坏甚至穿孔。

【造模方法】选用健康家兔，体重2.0kg左右，雌雄不限。造模前进行外眼检查，无异常者用于造模。造模前先进行细菌接种液的制备，将4℃冰箱保存的铜绿假单胞菌接种到普通琼脂培养基上，36℃环境培养24～48小时，用铂金耳环刮下菌落，用生理盐水配成2×1000000000/ml浓度(光电比浊仪测定浓度)。造模时，用丁卡因对家兔眼进行局部轻度麻醉，用环钻压迫角膜无反应，先后用7mm和4mm直径角膜环钻轻轻按压角膜顺时针旋转，造成环形创伤。拉开眼睑成杯形，用1ml注射器吸取2×1000000000/ml菌液滴于兔眼0.1ml/眼，感染单眼。24小时后观察眼部症状并进行评分，连续观察7天。

0级：眼明亮无分泌物；0.5级：无分泌物覆盖，眼稍有红肿；1级：分泌物覆盖小于6mm；2级：分泌物覆盖充满6mm；3级：分泌物覆盖大于6mm。

感染后第1、3、5天用无菌生理盐水棉签取感染眼和对照眼分泌物，分别放入4ml生理盐水中混匀(待检液)。吸取1ml待检液加入无菌培养皿(90mm直径)，将加热融化再冷却至45℃左右的营养琼脂倒入培养皿15ml，轻轻顺时针摇匀，待冷凝后置36℃培养箱24小时，判断细菌阴阳性。

【模型特点】接种24～48小时后，患眼出现大量微黄色分泌物，眼结膜严重充血，角膜混浊，双眼紧闭，脓性分泌物使眼睑粘连，轻轻拉开兔眼分泌物覆盖全角膜，几乎无法窥见虹膜瞳孔。第5天除少数眼评分为2.0级外，多数可达3.0级。细菌培养结果：接种后第1、3、5天分泌物培养均呈阳性。角膜病理切片显示：角膜高度水肿、混浊，前1/3基质可见大量中性粒细胞、淋巴细胞、成纤维细胞和坏死组织。上皮下伤口溃疡未愈合。角膜基质中可见新生血管，部分切片可见角膜穿孔，前房积脓。虹膜血管扩张、充血并有大量炎细胞浸润。

【模型评估和应用】本方法采用角膜环钻造成角膜损伤其操作简单，便于掌握。但造模者手法的轻重差异，会造成角膜损伤深浅不一致，在实验分组时应按评分标准均匀分组，使每组动物模型炎症程度无明显差异。本法建立的动物模型适用于临床抗菌药物筛选。