实验方法
肾上腺素诱发所致快速室性心律失常模型
【造模机制】大剂量的肾上腺素可直接兴奋β受体,使心脏自律性、传导性、应激性等提高而导致心律失常(室性期前收缩、室性心动过速甚至心室颤动),如氯仿与肾上腺素合用更增加对心脏的毒性。
大鼠:选用6~8周、体重200g左右大鼠,将大鼠麻醉,仰卧固定,切开腹股沟部皮肤,分离股静脉,用5号头皮针穿刺并固定,连接恒速输液泵。以供静脉恒速给予肾上腺素用。把针电极刺入大鼠四肢皮下,并与心电图机及心电示波器相连,手术完毕,记录正常Ⅱ导心电图。静脉注射0.9%氯化钠1ml,分别在0、1、2、3、4、5分钟记录一段心电图,发现有心律不齐的动物予以淘汰。筛选出合格大鼠恒速静脉注射肾上腺素40μg/kg体重,速度为1ml/min。记录给药时间,密切观察示波器上动物心电变化,注射完毕立即描记心电图,连续描记30秒,随后每隔10秒记录一次,直至心电完全恢复正常。
家兔:选用2.5kg左右体重的家兔,仰位固定于兔固定板上,以兔头夹固定头部,将针电极刺入四肢皮下并与心电图机、心电示波器相连。用麻醉口罩罩住家兔嘴和鼻部,将氯仿慢慢滴在麻醉口罩上进行吸入麻醉,注意观察角膜反射。当角膜反射刚刚消失时(此时约进入麻醉第三期第一级),记录正常Ⅱ导心电图后,立即由耳缘静脉快速注入0.01%肾上腺素溶液0.5ml/kg体重,注射完毕后,立即记录心电图,以后每隔30秒记录一次,直至心律恢复正常为止。
【模型特点】该模型在快速注入。肾上腺素后迅速出现一源性或多源性室性期前收缩,阵发性心动过速,甚至出现心室颤动,通常维持4~7分钟左右,大部分动物在10分钟可完全恢复窦性心律。此模型的动物不会死亡,在间隔一天后通常可以再进行实验,因此可以对同一动物采取自身对照的实验方法,减少动物个体差异带来的实验误差。
【模型评估和应用】该模型方法简便,反应快、维持时间短、可反复多次重复,心律失常程度可用增减肾上腺素给药剂量的办法进行控制,可进行自身对照,不易产生快速耐受现象。适用于防治室性心动过速药物的研究。在筛选抗心律失常药物研究中,选用小动物做模型较有优势,可进行大批量的筛选工作,方法简便,不需特殊仪器,且氯仿诱发的室颤发生率高较易观察。但这种方法诱发心律失常类型多样且互相演变,不利于药物间的效应比较。
因而,模型应用过程中,需要注意如下几点:①采用氯仿麻醉时,氯仿剂量对实验结果影响很大,故麻醉深度要掌握尽量一致;②注射肾上腺素速度要快,因为心律失常持续时间较短,需要及时观察,准确计算和记录。