1. 甲状腺摘取术

甲状腺位于甲状软骨的紧下方、气管腹侧,其左右成对,色淡红。左右甲状腺通过峡部的连接桥连接。在甲状腺的上部1/3处,有一个比甲状腺色浅的粟粒大的甲状旁腺紧紧贴在甲状腺上。

(1)家兔甲状腺摘除术   取家兔仰卧位,绑紧于家兔固定台上;手术部位使用脱毛剂脱毛;乙醚麻醉后,使用2%碘酒及75%酒精进行皮肤消毒,并铺消毒巾;沿颈部正中线自甲状软骨下切开颈部皮肤及其下层的阔约肌并开始分层;钝性分离颈筋膜及血管,用三齿或四齿的钝钩自将其从正中线拉向两侧,从而分离出位于气管上方前面及侧面的甲状腺;结扎甲状腺上下动脉及甲状腺静脉,摘除甲状腺;将肌肉及皮肤分层缝合,缝合处消毒灭菌,敷消毒纱布,将实验 动物置温暖处观察饲养。

(2)大鼠甲状腺摘除术   取大鼠仰卧位,绑紧于大鼠固定板上;手术部位使用剪毛剪剪毛;乙醚麻醉后,使用2%碘酒及75%酒精进行皮肤消毒,并铺消毒巾;沿大鼠颈部皮肤正中线切开2cm切口,挂上开创器;用镊子将皮肤下的领下淋巴结分开,重新挂上开创器,暴露肌层;纵向分开肌肉后,可见到气管及附着在气管上的一对甲状腺;将甲状腺峡部分开后,使用眼科镊夹住其末端,从气管上分离甲状腺;剥离完最前端的附着物后,用眼科镊夹住止血后即可摘除甲状腺;将肌肉及皮肤分层缝合,缝合处消毒灭菌,敷消毒纱布,将实验动物置温暖处观察饲养。

2. 垂体摘除术 

垂体位于动物中脑正中线与耳道口连线的交叉点上。啮齿类实验动物因蝶鞍平整,垂体易被摘除而较常用。下面以大鼠的咽旁法摘除大鼠垂体手术步骤为例介绍如下。

将大鼠麻醉后腹面向上固定于板上;剪去大鼠颈部被毛,局部常规消毒;对动物作颈正中切口并钝性分离皮下筋膜及领下腺,直到暴露出胸骨舌骨肌;从由侧胸骨舌骨肌外侧缘向下、自内分离肌肉层,直到颅底正中线,找到枕骨嵴;由枕骨嵴向两侧剥离附着于枕骨上的肌肉 , 并 向上延伸分离出枕蝶缝合;以枕骨嵴与枕蝶缝合的交点为中心钻颅区。钻颅时用弯尖眼科镊子向头端拉咽后壁,一方面暴露钻颅区,另一方面保护咽后壁不被损伤。调节钻颅针针芯约长于针齿0.5mm, 并将针芯固定于枕骨嵴与枕蝶缝合的交点,垂直向下钻动,到感觉骨板钻通,阻力减弱时,立即拔出钻颅针;用小棉球沾去钻孔的渗血,用带钩的长直针挑出或配合用直尖眼科镊子夹出外、内骨板,用三角针挑破垂体的脑膜,便可见粉红的垂体。大鼠的脑垂体位于间脑腹面,与丘脑下部相连。由于大鼠垂体嵌在颅底骨蝶骨的垂体窝内,故摘丘脑时很容易将垂体剥离。大鼠垂体背面紧贴在脑桥前方的横沟内。从矢状切面观察,大鼠脑垂体大致呈三角形;然后使用连接到1/8马力吸引器的玻璃管吸出垂体。若发现有出血情况,可使用沾有肾上腺素的小棉球压迫止血;手术完毕,缝合伤口。

3. 胸腺摘除术

实验动物的胸腺摘除术常使用幼龄小鼠或新生小鼠,也可以使用成年小鼠。下面介绍成年小鼠和新生小鼠的胸腺摘除手术步骤。

(1)成年小鼠的胸腺摘除术   麻醉小鼠后固定(小鼠头部转向手术者),常规进行皮肤消毒;沿颈中线纵切至上胸,去筋膜,分离胸骨甲状肌和胸乳头肌,暴露出腹侧气管;使用虹膜钳单齿臂分开胸骨甲状肌 , 使用牵引器将两肌推向两侧并暴露气管查看中隔;使用弯细分离钳提起胸骨,见到小鼠胸腺上叶;使用弯角吸引器玻璃导管(内径 6mm)伸至中隔2mm,导管连接吸引烧瓶和真空泵 98.6kPa 并将吸引器调至0.667kPa(适当情况下可用手指遮盖抽气口);吸管逐步深入中隔(可滴一滴甘油于中隔)将左叶吸取;同法吸取右叶;胸腺摘除完毕后除去牵引器将肌肉复位,并缝合肌层和皮层。

(2)新生小鼠的胸腺摘除术   将新生小鼠置于冰箱中,5～lOmin 后可见到小鼠皮肤由红色变为苍白、呼吸停止(以镊子夹四肢或尾巴无反应为宜);固定小鼠于固定板上使用常规法 院灭菌处理;在手术放大镜视野下于胸骨正中线纵行切开皮肤长约 5mm,并使用眼科镊分离皮下组织和胸骨后软组织;然后使用眼科剪从颈部向下沿正中线纵行剪开胸骨到第二助间;暴露胸腺后分离并游离每叶胸腺;然后手术者经口负压使用玻璃吸管(内径 0.8～1.6mm,吸管另一端连接有橡胶管和输液滴管)可将胸腺完整吸出;胸腺取出后,将切口缝合并消毒处理。

4. 肾上腺摘除术 

实验动物的肾上腺摘除分为单侧肾上腺摘除和双侧肾上腺摘除两类。                      

大鼠肾上腺与肾脏不相连,位于肾脏上方的腹后壁,呈浅黄色的豆形。下面以大鼠的肾上腺摘除手术为例介绍手术步骤。

将大鼠麻醉后固定于手术台上,背部剪毛,常规消毒处理;在胸腰椎交界处,沿腹部正中线切开皮肤约3～4cm,并使大鼠向左侧位;在左肋缘与脊柱交界处,纵向剪开薄层腰肌(切口约1～2cm),撑开切口即可暴露出深红色的肾脏;用蚊式钳将周围脂肪分离,并在肾上腺下面将通至肾上腺的血管紧紧夹住,也可用缝线结扎;然后使用无钩弯小镊改制的环形镊将肾上腺摘除,也可用小剪刀将肾上腺剪下;缝合肌层及皮层。

同法摘除左侧肾上腺

5. 肾脏摘除术

实验动物的肾脏切除术可分为全肾切除、肾大部切除、部分肾切除三种。下面介绍大鼠的全肾、部分肾切除手术。 

(1)大鼠的全肾切除术  腹腔注射麻醉实验大鼠后,将大鼠俯卧位固定于固定板上;常规手术部位消毒、铺巾。以肋脊角为标志作左或右背部斜切口,逐层切开分离进入腹腔,找到肾脏,并使用止血钳分离肾脏周围脂肪囊和肾蒂(应特别小心分离开肾上腺)。充分暴露肾脏后,用手将肾脏牵引出切口外,然后左手夹持肾脏向外牵拉,右手使用止血钳在肾门下将肾蒂夹住,确认肾脏动脉、肾静脉和输尿管在内后,用线在钳夹处作双道线结扎和缝合结扎。使用剪刀剪断结扎线上部肾蒂,清理腹腔后提起未剪断的肾蒂结扎线头,并将结扎的肾蒂放入腹腔。确认腹腔无出血后剪断结扎线头,缝合腹腔、腹壁。

(2)大鼠的肾脏大部切除术   同上法分离出肾脏后,用刀片或剪刀直接剪去上下极。

操作步骤为:切除左侧肾脏→明胶海绵压迫断面止血→检查出血点→清理腹腔→缝合;也可以结扎肾动脉静脉及输尿管,切断结扎部取肾。具体操作步骤为:游离左侧肾脏→切开肾脏被膜→暴露肾实质→使用直针穿线,穿透肾实质→打扣→拉紧肾脏,直到肾脏勒断→复位制→清理腹腔→缝合。

6. 肝切除术

实验动物的肝叶切除可根据实验目的选用一叶或几叶切除。肝脏切除手术的关键是正确分离和结扎肝叶动脉、静脉血管。下面以大鼠的肝脏切除术为例简要介绍手术步骤。

将大鼠麻醉(戊巴比妥钠 4Omg/kg)后仰卧固定于手术台上;将剑突以下的腹部被毛沾上肥皂水用剃毛刀剃干净,并使用脱毛剂脱毛;常规消毒、铺巾;在剑突下腹部正中线使用手术刀切开皮肤(一般 200g 左右的大鼠,切口长度维持在2～2.5cm 左右),然后使用有钩小镊提起腹肌,圆头手术剪剪开腹肌,切口长度约2cm 左右;然后用酒精棉将手术切口周围和手术者的手指消毒后,将肝脏从腹腔拉出 (注意两手手指夹住切口的两侧稍向前方推并压迫腹部),待切除肝脏的肝叶完全暴露于腹腔外;将肝脏推向手术者的左侧,暴露出透明的膜状结缔组织并分离,然后将肝脏轻轻向后拉;切断位于剑突突起的内侧与切除的肝叶之间的膜样结缔组织;将结扎用线放置于剑突突起部,用两手拇指将肝脏轻轻向下方牵引,尽可能使结扎线靠近肝叶的蒂部;用拇指将肝脏翻到上方并将结扎线两端交叉结扎,用中指将肝脏向上牵引,在尽量靠近肝脏蒂部的地方用力结扎,从而阻断肝叶的供血;提起待切除肝叶,使用剪刀从蒂部切除,取出切除之肝叶 ; 检查腹腔及结扎部;常规缝合肌层与皮层,消毒后包扎;术后7d左右拆线。

7. 卵巢摘除术

在与性腺有关的内分泌研究中,为了排除卵巢的影响,有时会在动物幼龄期进行动物卵巢摘除手术,待手术创面愈合后使用。下面介绍大鼠的卵巢摘除手术步骤。

将大鼠麻醉后固定于固定板上,然后以最后肋骨稍后方为中心剪毛;按照动物皮肤标准消毒脱碘;自腰椎沿背部正中线向下作纵行切口约1～2cm切开皮肤,使用圆头剪插入皮肤和肌肉之间一边扩张一边剥离 (注意摘除左侧卵巢时实验动物取右侧卧位,反之亦然),并在皮肤创口上挂上开创器;使用有钩镊子夹住从创面看到的肌层,在离脊柱约 1cm处沿肩肝线分别于左右两肋下剪开长约1cm切口的腰肌,可见位于两侧肾脏外下方呈淡红色的卵巢及其子宫角。重新挂上开创器 , 暴露脂肪组织,并使用带环镊子轻轻夹住脂肪组织并将其拉出身体 ; 在子宫角上部及下部的卵巢管的部位做两个结扎,结扎后用环形镊切断子宫角,将卵巢取出;取出卵巢后将脂肪组织还纳到腹腔,将腹膜与肌层一起缝合一针后并检查有无出血,最后间接缝合法缝合皮肤。反之亦然。

卵巢摘除术的结果判定:手术动物经两周的恢复后,使用动情周期阴道涂片检查实验大鼠是否存在动物周期的细胞学特征,应确认无动物周期的出现。

8. 输精管结扎术

由于实验研究的需要,有时候需要对实验动物进行去势手术。下面介绍大鼠的输精管结扎手术。

手术步骤:将已经麻醉的大鼠仰卧位固定,使用剪毛剪将后肢两膝连线上的毛剪净,常规消毒脱碘;使用有钩镊子夹起皮肤,沿两膝连线用直剪做长1～1.5cm的切口;然后使用圆头剪插入皮肤与肌层,边扩张边分离;使用有钩镊子将肌层夹起,切一长约1.5cm 的切口;自切口处拉出脂肪组织,将一侧睾丸拉出体外;使用剪刀和镊子,分离输精管, 在倒"U"形处双缝合线结扎;确认无误后剪断;手术完毕将睾丸及其附属组织回纳到腹腔。

同法结扎另一侧睾丸输精管;缝合肌层与皮层。