Masson染色法是利用两种或三种阴离子染料混合或先或后作用而完成鉴别染色的。它是一种用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一，原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色。

Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色（被苯胺蓝所染）或绿色（被亮绿所染），肌纤维呈红色（被酸性品红和丽春红所染），这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。不同的组织和细胞成分，它们的空隙大小是不一样的。空隙的大小决定了组织的渗透性。如空隙小，组织结构致密，渗透性低；空隙大，组织结构疏松，渗透性高。根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子染料进行染色，可以把不同组织成分显示出来。而染料分子的大小主要由分子量来体现。小分子量物质易于穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子物质只能进入结构疏松、渗透性高的组织。一般来说，结构疏松、渗透性高的组织多选择大分子染料，而结构致密、渗透性低的组织则多选择小分子染料。

1. Masson试剂成分

    主要成分含有苏木精染液、酸性品红、丽春红、苯胺蓝（或亮绿）、醋酸等。

2. Masson染色适用范围及意义

胶原纤维在体内分布广，来源于间胚叶的肿瘤、平滑肌瘤、横纹肌瘤、神经纤维瘤，甚至它们的肉瘤等都产生一定的纤维。这些纤维在HE染色中都染成红色而难以区别，但是通过masson染色一般可以分出该肿瘤组织是胶原纤维源性或是肌源性还是神经纤维源性。其应用主要表现在以下几个方面：

（1）显示组织、器官的损伤或炎症的修复与纤维化程度；

（2）判断心肌坏死后被纤维结缔组织所取代的区域，masson染色后胶原纤维呈红色，心肌纤维呈黄色；

（3）鉴别心肌纤维化与心内膜弹纤维增生症；

（4）区别胶原纤维透明变性与淀粉样变性；

（5）对肿瘤方面提供诊断和诊断鉴别的依据。

3. Masson三色法染色步骤

（1）石蜡切片脱蜡至水；
（2）铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）；
（3）依次自来水和蒸馏水洗。
（4）用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5－10 min；
（5）充分水洗，如过染可盐酸酒精分化；
（6）蒸馏水洗；
（7）用Masson 丽春红酸性复红液5－10 min；
（8）以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻；
（9）1%磷钼酸水溶液分化3－5 min；
（10）不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5 min；
（11）以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻；

（12）95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固；

（13）选择合适的倍数，调整视野，光学显微镜下观察样本形态结构。

    结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色（如光绿液染色为绿色），胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。

4. 注意事项

（1）控制好染色步骤；
（2）组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间；
（3）0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳；
（4）磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制， 肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。

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