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模型制备

椎基底动脉供血不足动物模型

2018年11月14日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin
摘要:椎基底动脉供血不足是神经科的一种常见病,主要表现为脑干、小脑及枕叶皮质缺血症状,临床上出现眩晕、恶心、呕吐、视力下降、共济失调、眼震,严重者可有构音困难、吞咽障碍,甚至发生一过性晕厥。这些症状因缺乏特异性,很易与类似表现的其他疾病混淆。因此,复制出相应的动物模型用于此疾病的研究就显得非常必要。

椎基底动脉供血不足是神经科的一种常见病,主要表现为脑干、小脑及枕叶皮质缺血症状,临床上出现眩晕、恶心、呕吐、视力下降、共济失调、眼震,严重者可有构音困难、吞咽障碍,甚至发生一过性晕厥。这些症状因缺乏特异性,很易与类似表现的其他疾病混淆。因此,复制出相应的动物模型用于此疾病的研究就显得非常必要。

1 兔模型(Model of rabbits)

(1)模型复制  体重为2.0~3.0kg的健康家兔,经耳缘静脉注射戊巴比妥钠(按25~30mg/kg体重的剂量)或20%乌拉坦(按5ml/kg体重的剂量)麻醉,仰卧固定于手术台上,剪除颈部毛发,手术皮肤常规消毒。取颈部正中切口切开皮肤至第一肋骨上缘,分离出气管,行气管插管,沿右侧锁骨下动脉找到右侧椎动脉并结扎。手术过程中适当加温,使家兔体温保持正常及减少术中出血量。

(2)模型特点  模型动物脑干的HE染色切片显示神经结构基木正常,部分神经元细胞肿胀、尼氏体减少或消失,胶质细胞轻度增生,部分神经纤维肿胀,有小片状坏死灶,符合脑干缺血的病理改变。

(3)比较医学  一般认为在颅外走行曲折、纤长的椎基底动脉,易受椎体及其附属结构的压迫和/或动脉粥样硬化所致血管本身的损伤,引起血管的狭窄或闭塞。此外全身血液动力学的异常和血液流变学的改变也影响椎基底动脉系统供血。研究证实,大部分椎基底动脉供血不足患者在缓解期椎基底动脉供血系统的血流量就是减少的,但可无明显症状。一旦在某种因素作用下使潜在缺血区的脑血流量进一步减少至功能阈值以上才引起椎基底动脉供血不足临床症状的出现。此模型通过结扎家兔单侧椎动脉造成椎基底动脉供血不足,为临床椎基底动脉梗死溶栓治疗后脑干功能变化的观察指标提供了实验理论依据,具有重复性好、操作较方便的优点。

2 豚鼠模型(Model of guinea pigs)

(1)模型复制  体重为250~350g的成年白化雄性豚鼠(耳廓反射灵敏),按1.5g/kg体重的剂量经腹腔注射乌拉坦麻醉,仰卧位,特制豚鼠头架固定头颅,电热毯保持体温恒温(肛温38℃左右)。剃除手术区域毛发,皮肤常规消毒,行颈前正中切口,气管切开插管,自主呼吸。解剖右颈总动脉,动脉插管,与二道生理仪相连以测量血压。腹侧径路打开听泡,暴露耳蜗。正中分离胸骨舌骨肌和肩脚舌骨肌及附着于枕骨底的头长肌,暴露枕部颅底。手术显微镜下磨出一5mm×7mm的骨窗,即可见其下的基底动脉及其分支小脑前下动脉,游离基底动脉,在小脑前下动脉以近的基底动脉下穿过一条“0”号丝线,其上放一重0.5g金属球,造成基底动脉血流部分阻断。

(2)模型特点  手术显微镜观察可见基底动脉内血细胞流动。血管阻断后,血管内血细胞流动数量立即明显减少,流速减慢,且血管管径变细。脑干电图描记显示,阻断前脑干电图呈密集波,波幅大;部分阻断后呈现波幅变小、频率减低,也有表现为波幅明显变小,而频率不变,并随阻断时间延长而加剧;在基底动脉完全阻断后脑干电波不消失,但波幅和频率明显减低。

脑受颈动脉系和椎基底动脉系血管供应,两系间有大脑动脉(Willis)环彼此联系。制作颈动脉或椎基底动脉系脑缺血模型都应考虑大脑动脉(Willis)环在其中之一血管阻塞时侧支供血问题。在制作大脑缺血模型时,在结扎双侧颈总动脉前先结扎双侧椎动脉或基底动脉,即是基于阻断大脑动脉环侧支供应的考虑。此模型在制作中先阻断一侧颈总动脉,随后部分阻断基底动脉,造成基底动脉脑供血区部分缺血。在基底动脉下放置一“0”号丝线,其上放一重0.5g金属球阻断血管,其作用是刺激血管造成血管痉挛,并缩窄血管,作用显著。撤除丝线和金属球血流可逐渐恢复。手术显微镜下见基底动脉内血细胞移动数量和速度立即明显减少。用脑干电图检查均显示波形频率和振幅的明显变化。自发性脑电活动和脑干听诱发电位能很好地反映脑缺血状况。耳蜗血流减少更是基底动脉分支供血减少的直接证据。

(3)比较医学  本模型部分阻断的是小脑前下动脉邻近的基底动脉,而非其分支小脑前下动脉或内听动脉;是椎基底动脉阻断所造成的内听动脉缺血所致的内耳变化,而非单纯的小脑前下动脉或内听动脉阻塞所致的内耳病变。内听动脉80%为小脑前下动脉分支,20%直接来自基底动脉,说明阻断小脑前下动脉邻近的基底动脉,不论内听动脉是直接来自基底动脉还是来自小脑前下动脉,都可达到减少内耳供血的目的。本模型作为椎基底动脉供血不足动物模型,对于以上方面的研究具有科学性和可重复性的优点。

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