大鼠/小鼠红外热像检测单元
大鼠/小鼠体表不同部位的温度,可以被红外热像仪所记录。阳热盛者,体表温度会升高;阴寒盛者,体表温度会降低。采用红外热像仪可以完整地记录其体表温度的改变,用于判断其寒热。由于红外热像仪所检测到大鼠/小鼠眼睛的温度,更接近其体内温度,类似于采用口腔温、肛温检测体内温度,取其检测结果与体表不同部位温度比较,可以检测阳气的外散和内敛,对于阳明经证、腑证,以及是否存在阳气内郁的辨证有所帮助。
(1)设备
ThermaCAM P30红外热像仪(图3-2-1,瑞典FLIR Systerm公司生产,该设备由一台内置36mm镜头的红外照相机及一系列附件组成,红外照相机可对物体发出的红外辐射进行测量和成像,根据辐射与物体表面温度存在函数关系的原理,照相机可计算并显示出该温度)及配套图像处理软件,标准红外热像仪固定架,大鼠/小鼠水平旋转站台,个人电脑,SPSS10.0统计软件等。
(2)方法
1)相机固定:将相机置于三脚架或桌面稳固的台面上,使红外热像仪镜头与被检测的大鼠/小鼠在同一水平面。
2)打开照相机:将电池插入电池盒;轻按绿色的“ON”按钮打开照相机;并将镜头保护盖打开。
3)相机参数设置:依据实验需要设置有关参数,如距离设置60cm、环境温度20℃、大气温度24℃、相对湿度60%、辐射值0.98、调色板、等温线、电平及温宽等。
4)预对焦:将照相机指向需要拍摄对象的背景面(如墙壁),按下A按钮并保持一秒以调整焦距(轻按A按钮可自动调整焦距)。
5)将待检测大鼠/小鼠连笼具轻轻移入检测室。
6)实验动物站立平台的安放:将实验动物如小鼠站立平台放置与相机镜头距离60cm位置,且平台上面与相机镜头下缘平齐(即使小鼠侧面中线与相机圆点基本处于同一水平面,使小鼠照片在图像中位置大体居中)。
7)两人操作:抓持者轻持大鼠/小鼠,安放在水平旋转站台上,轻轻旋转,使之侧面朝向红外热像仪。拍摄者观察液晶显示器内大鼠/小鼠位置,并要求抓持者适当移动站台,以保证大鼠/小鼠全身和尾巴在视野内,拍摄。
8)小鼠角度调节:将小鼠放置于站立平台面上,轻轻旋转,令小鼠侧面对着相机。
9)图像采集:轻按A按钮以自动调整照相机焦距,待小鼠侧面全部暴露、图像清晰时,按S按钮快速冻结图像。
10)图像保存:按S按钮数秒钟后,即将图像保存。
11)以同样的方法,对不同实验大鼠/小鼠拍摄红外热像图。通常30min内可拍摄60只大鼠/小鼠。依次直至各组大鼠/小鼠拍摄完毕。
12)关闭照相机:轻按绿色的“OFF”按钮关闭照相机,并取出电池。
13)将CF存储卡上的照片拷贝至电脑中,处理备用。
14)采用ThermaCAM Reporter 2000专业版软件和保护狗程序可以对图像进行处理,以分析小鼠侧面不同部位的温度(图3-2-2):取眼睛中最高温度点的温度(℃)、取前肢后缘和后肢前缘中间躯体范围的平均温度(℃)、取躯体后部对着尾根部前缘的最低温度(℃)。必要时可以选择特定部位(如眼睛、胸部、腹部、腹股沟、尾部等)的温度(℃)。
(3)注意事项
1)红外热像仪距检测目标愈近,所检测的温度愈贴近真实;愈远则愈偏离真实。相同检测条件所检测的不同大鼠/小鼠,可以比较。
2)相机镜头与动物之间距离需恒定。
3)抓鼠动作宜轻,以免造成动物的不适和挣扎。
4)尽可能在抓出笼具后最快速度内完成拍摄。
5)尽可能减少大鼠/小鼠转台上的旋转,干扰体表温度。
6)大鼠/小鼠的侧面站姿暴露面积尽量多,有利于分析不同部位的温度差。
7)拍摄时宜使大鼠/小鼠站在平台上稍息约15秒后再拍摄,否则处于大鼠/小鼠活动、探究、紧张等状态下体表温度略有升高。
8)检测环境温度、湿度等条件一致。
9)有关热像仪的保养与清洁:禁止热像仪机身、电缆和附件使用苯、稀释剂或其他任何化学产品,以免引起损坏;所有镜头均涂有抗反射涂层,可使用96%乙醇或二乙醚溶液浸泡过的棉绒清洁。镜头上出现干涸的污渍时可使用含50%丙酮和50%乙醇的清洁溶液进行清洁。