信息发布
您现在的位置：首页
利用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠
2017年01月06日
来源：中国比较医学杂志 2016年第12期
作者：赵勇 师长宏 赵亚 辛智倩 刘佩娟 张彩勤 白冰 白杰英 王华 张海
责任编辑：admin
摘要：本研究拟以CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6小鼠中miRNA-29b1基因，以研究miRNA-29b1基因在酒精性肝损伤及纤维化中功能。
目的：应用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。
方法：针对miRNA-29b1基因设计一段sgRNA，sgRNA和Cas9体外转录后显微注射至C57BL/6小鼠受精卵细胞。小鼠出生后取其基因组DNA进行测序以鉴定基因型，同时取小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器研磨后提取总RNA，通过real-time PCR分析miRNA-29b1在这些脏器中的表达。
结果：设计了20 bp的miRNA-29b1sgRNA并与Cas9一起进行了体外转录，显微注射小鼠受精卵细胞后获得miRNA-29b1基因突变小鼠。测序结果表明突变小鼠有两种基因型，一种为10 bp的缺失突变；另一种为22 bp的缺失突变，同时伴有3 bp的插入突变。与野生型小鼠相比，基因突变小鼠心、肝、脾、肺、肾等组织中miRNA-29b1表达量下降明显。
结论：应用CRISPR/Cas9技术成功构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。
上一篇：miRNA与热应激的关系及检测方法进展[ 01-20 ]
下一篇：阿霉素诱发肾性水肿病症大鼠模型的建立[ 01-06 ]
编辑信箱
欢迎您推荐或发布各类关于实验动物行业资讯、研究进展、前沿技术、学术热点、产品宣传与产业资源推广、产业分析内容以及相关评论、专题、采访、约稿等。
我要分享 >对不起，暂无资料。
热点资讯
- 年
- 月
- 周
最新专题
