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洁净室沉降菌检测

2015年09月29日来源：原创作者：李晓菲责任编辑：wlladmin

摘要：洁净室沉降菌检测

1 目的

检测实验动物生活环境。主要包括洁净室空气质量等卫生状况，判断微生物污染程度。

规范沉降菌检验的基本原则、技术要求和方法程序。

2 内容

2.1 设备材料

2.1.1 冰箱：0℃～4℃。

2.1.2 恒温培养箱：36℃±1℃。

2.1.3 恒温温水浴锅：46℃±1℃。

2.1.4 架盘药物天平：0g～500g，精确至0.5g。

2.1.5 放大镜4×。

2.1.6 灭菌吸管：1ml(具0.01ml刻度)、10ml（具0.1ml刻度）。

2.1.7 灭菌培养皿: 直径90mm。

2.1.8 灭菌试管：16mm×160mm。

2.1.9 pH计或精密pH试纸。

2.2 检验步骤

2.2.1 培养基和试剂（见沉降菌检验试剂及配制的标准操作规程）

2.2.2 采样方法

将制备好的培养皿按采样点布置的要求打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。

2.2.3 培养

2.2.3.1 全部采样结束后，将培养皿置于恒温培养箱中培养。

2.2.3.2 在30℃～35℃培养箱中培养，时间不少于48h。

2.2.3.3每批培养基应有空白对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定2只培养皿作空白对照培养。

2.3 菌落计数

2.3.1 用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镱检查，有否遗漏。

2.3.2 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。

2.4 检验规则

2.4.1 检验状态

2.4.1.1 沉降菌检验前，被检验洁净室的温湿度须达到规定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。

2.4.1.2 沉降菌检验前，被检验的洁净室已经过消毒。

2.4.1.3 检验状态有静态和动态两种，检验状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明检验状态。

2.4.2 检验人员

2.4.2.1 检验人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。

2.4.2.2 静态检验时，室内检验人不得多于二人。

2.4.3 检验时间

2.4.3.1 对单向注流，如100级净化房间及层流工作台，检验应在空调系统正常运行不少于10min后开始。

2.4.3.2 对非单向注流，如10000级、100000级以上的净化房间，检验应在净化空调系统正常正常运行不少于30min后开始。

2.5 沉降菌计数

2.5.1 采样点数目及其布置

2.5.1.1 最少采样点数目

沉降法的最少采样点数可按表1确定。

2.5.1.2 采样点的布置

采样点的位置见图1.

a) 工作区采样点的位置离地0.8m～1.5m左右(略高于工作面).

b) 可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点.

2.5.1.3 在满足最少测点数的同时,还宜满足最少培养皿数，见表2。

表1 最少采样点数目

表2 最少培养皿数

2.6 结果计算

2.6.1用计数方法得出各个培养皿的菌落数。

2.6.2 平均菌落数的计算，见式(1)。

M1+M2+…Mn

平均菌落数M= ………………………(1)

式中：M-平均菌落数；

M1-1号培养皿菌落数；

M2-2号培养皿菌落数；

Mn-n号培养皿菌落数；

n-培养皿总数。

2.7结果评定

2.7.1沉降菌的判定标准见表3。

表3 沉降菌的判定标准

2.7.2 用平均菌落数判断洁净室（区）空气中的微生物。

2.7.2.1 洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定评定标准中的。

2.7.2.2 若某洁净室（区）内的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，检验结果均须合格。

表1

面积（m²）	洁净度级别
	100	10000	100000
<10 ≥10～<20 ≥20～<40 ≥40～<100 ≥100～<200 ≥200～<400 ≥400～<1000 ≥1000～<2000 2000	2～3 4 8 16 40 80 160 400 800	2 2 2 4 10 20 40 100 200	2 2 2 2 3 6 13 32 63	2
				2
				2
				2
				3
				6
				13
				32
				63
比例