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目的 探讨小鼠肝枯否细胞和肝星状细胞的提取及纯化方法,为小鼠原代肝非实质细胞分离提取 方法学提供参考和建议。

方法 以体内胶原酶灌注消化为基础,使用 Percoll、OptiPrep 等不同的试剂和浓度梯度分 别提取 C57BL/ 6 小鼠的肝枯否细胞和肝星状细胞,并通过流式细胞仪、免疫荧光等方法验证纯化细胞的纯度。 

结果 两层 Percoll 法提取枯否细胞和两层 OptiPrep 法提取肝星状细胞可行,纯度可达 90%以上,细胞得率为 1 ~ 2× 10 7 / 肝,细胞存活率在 90%以上。 细胞原代培养 48 h 后,枯否细胞 F4 / 80 阳性细胞、肝星状细胞 α-SMA 阳性细胞 均达 90%以上。

结论 小鼠肝中枯否细胞和肝星状细胞的分离提取方法完善可靠且具有成本效益和可重复性。

阅读原文：小鼠肝枯否细胞和肝星状细胞分离提取方法的比较及优化.pdf